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黃原膠搖瓶發(fā)酵條件的優(yōu)化研究

發(fā)布日期:2015-06-07 10:34:56
黃原膠是以玉米淀粉為主要原料,由野油菜黃單胞菌或甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌發(fā)酵而產(chǎn)生的一種微生 物胞外多糖 .它是一種生物高分子聚合物,由D-葡萄糖、D-甘露糖、D-葡萄糖酸、乙酸和丙酮所組成的 “五糖重復(fù)單位”聚合而成[2].因?yàn)辄S原膠液具有懸浮性、假塑性、食用安全性和良好的配伍性,所以被廣泛 地運(yùn)用到食品、醫(yī)藥、化妝品、鉆井和陶瓷等行業(yè)[3,].黃原膠成品粘度高低是評價(jià)黃原膠品質(zhì)好壞的重要 指標(biāo)之一,黃原膠成品粘度的高低與發(fā)酵時(shí)的溫度,pH,CaCO3添加量,搖瓶裝液量,培養(yǎng)基組成以及后處 理等諸多因素有直接或間接關(guān)系[5,],作者在實(shí)際生產(chǎn)中研究了發(fā)酵條件對黃原膠的產(chǎn)量和成品粘度的 影響.
1材料與方法
1.1菌種
甘藍(lán)黑腐病黃單胞囷ZZ-1(Xanthomonos campestris ZZ-1),為河南天冠集團(tuán)實(shí)驗(yàn)中心誘變囷種.
1.2培養(yǎng)基
1.2.1固體斜面培養(yǎng)基蔗糖20 g,牛肉膏3 g,酵母膏1 g,蛋白胨6 g,瓊脂15 g,水1 000 mL,pH7.2. 1.2.2種子培養(yǎng)基蔗糖20 g,牛肉膏3 g,酵母膏1 g,蛋白胨6 g,水1 000 mL,pH7.2.
1.2.3發(fā)酵培養(yǎng)基玉米淀粉 45 g,蛋白胨 4 g, MgSO4.7H2O 0.02 g, K2HPO4 1 g,水 1 000 mL.
1.3優(yōu)化方法
將培養(yǎng)的基本條件定為培養(yǎng)基發(fā)酵的起始條件,即溫度30 °C,pH 7, CaCO3添加量為0%,三角瓶裝料 量為20%和搖床轉(zhuǎn)速200 •mm-1,在其它條件不變的情況下,改變其中一個(gè)條件,測定其所產(chǎn)黃原膠的成 品粘度,并與基本條件下發(fā)酵生產(chǎn)的黃原膠成品粘度進(jìn)行比較.
1.4成品粘度測定方法
取成品黃原膠1 g,KCl 1 g,溶于98 g蒸餾水中,用機(jī)械攪拌裝置攪拌1 h,采用NDJ-1型旋轉(zhuǎn)粘度計(jì), 用3號轉(zhuǎn)子于25 C下進(jìn)行測定,轉(zhuǎn)速為60 •min-1.
2結(jié)果與分析
從圖1和圖2可以看出,培養(yǎng)基的起始pH值和CaCO3的添加量對發(fā)酵成品粘度有一定的影響.起始 pH值和CaCO3的添加量分別在7.2和0.30%時(shí)成品粘度較高,黃原膠質(zhì)量較好.
黃原膠中丙酮酸含量的高低直接影響成品的粘度高低[7].由于在黃原膠發(fā)酵過程中有乙酸和丙酮酸 生成,因此pH值呈下降趨勢.當(dāng)pH值下降到一定程度時(shí),不但會抑制黃單胞菌丙酮酸生成的代謝途徑, 還會嚴(yán)重影響黃單胞菌的生長繁殖,還必須添加適量的CaCO3起緩沖作用.當(dāng)發(fā)酵液的pH值過高時(shí),雖 然有利于丙酮酸的生成,但是嚴(yán)重影響了發(fā)酵期黃單胞菌的大量繁殖.因此,發(fā)酵液的起始pH應(yīng)保持中 性偏堿.
2.2發(fā)酵溫度對成品粘度的影響
在其它條件一定的情況下,改變搖瓶發(fā)酵的溫度進(jìn)行實(shí)驗(yàn),所得結(jié)果見圖3,從圖3可以看出,黃原膠 發(fā)酵的最適溫度應(yīng)為30 C.在該溫度下較對照29 C有顯著提高.
2.3裝料量對成品粘度的影響
在其它條件一定的情況下,改變搖瓶發(fā)酵的裝料量(裝料系數(shù)依次為15%,20%,25%,30%,35%, 40%),測定其對黃原膠發(fā)酵的影響(圖4).
從圖4可以看出,隨著三角瓶裝料量的增加,成品粘度逐漸下降,主要是因?yàn)殡S著裝料量的增加,發(fā)酵 液中的溶氧已不能滿足發(fā)酵的需要.黃原膠的發(fā)酵屬好氧發(fā)酵,其發(fā)酵液中溶氧越多,越有利于黃原膠中 丙酮酸的生成,導(dǎo)致成品的粘度也越高.而通過改變搖瓶裝料量可有效地改變發(fā)酵過程中的溶氧,所以黃 原膠生產(chǎn)中必須通過加大通風(fēng)量來提高溶氧.雖然15%的裝料量成品粘度要高于20%的裝料量,但考慮 到生產(chǎn)實(shí)際,選擇20%作為最佳裝料量.
圖4搖瓶裝料量對成品粘度的影響
圖3培養(yǎng)溫度對成品粘度的影響
2.4優(yōu)化培養(yǎng)條件與基本培養(yǎng)條件的比較
從上述結(jié)果可以看出,在pH 7.2, CaC〇3 0.30%,培養(yǎng)溫度30 °C,搖瓶裝料量為20%的條件下對黃原 膠產(chǎn)膠發(fā)酵比較有利,與基本發(fā)酵條件對比的試驗(yàn)結(jié)果見表1.
從表1可以看出,2種培養(yǎng)條件下,
表1最適培養(yǎng)條件與基本培養(yǎng)條件下成品粘度的比較
培養(yǎng)條件溫度/CCaCO3/ %裝料量/%pH值成品粘度/cp
優(yōu)化300.30207.21 410
基本290.00207.01 210
成品黃原膠的粘度差別比較大,用優(yōu)化 條件進(jìn)行發(fā)酵可將成品黃原膠的粘度提 高 16.53%.
3小結(jié)與討論
1)通過實(shí)驗(yàn),得到了黃原膠搖瓶發(fā) 酵的優(yōu)化條件為pH 7.2, CaCO3 0.30%,培養(yǎng)溫度30 °C,搖瓶裝料量為20%,在此條件下進(jìn)行發(fā)酵與基本 條件相對比,差異比較顯著.
2)黃原膠的成品粘度不僅與發(fā)酵條件有關(guān),還與培養(yǎng)基組成、碳源選擇等有關(guān),這方面還有待進(jìn)一步 研究,不過由于黃原膠的成品粘度與發(fā)酵終了粘度不呈正相關(guān)關(guān)系,因此,直接研究發(fā)酵條件對黃原膠成 品粘度的影響更具有實(shí)際意義.